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细胞培养是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法,该过程是从动物或植物中提取细胞,然后在人工环境中进行培养以进行科学研究。
通过细胞培养既可以获得大量细胞,又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。同时,细胞培养技术也是生命科学中常用的研究手段,该方法能排除神经体液因素的影响及肝、肾解毒功能的干扰,观察某些因素或药物对细胞培养的直接作用。但培养细胞失去体内细胞的制约和整体的调节作用,细胞形态和功能会发生一定程度的改变。培养方法、实验试剂对细胞形态和功能都有一定的影响,如胰蛋白酶可破坏细胞表面受体、酶、抗原等。此外,长期体外培养的细胞由于反复传代、冻存和操作等因素的影响,可能发生染色体非整倍体改变,呈永生化或癌变的特征。
细胞培养有悬浮细胞培养和贴壁细胞培养两种基本方式。
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长, 如淋巴细胞、造血细胞系等。该培养方式更容易传代,且过程不需要酶解或机械解离。但需要每日细胞计数和活力测定以观察其生长状况。可以通过稀释培养物的方式来刺激生长,同时需要搅拌(即振荡或搅拌)以进行充分的气体交换。
该方法可用于大量蛋白质生产、批量细胞收集及许多研究应用。
贴壁细胞分为皮细胞型,成纤维细胞型,游走细胞型和多型细胞型。
贴壁培养指细胞在人工基质上单层生长。在显微镜下观察时,贴壁细胞在瓶底伸展并延伸成梭型或不规则的三角形或扇形或其它形态,而且晃动培养液时,细胞不动。
培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样,当与底物贴附后,细胞将逐渐伸展而形成一定的形态,呈成纤维细胞样或上皮细胞样等。
该培养方式适用于大多数细胞类型,像在动物细胞培养过程中,必须有可以贴附的支持物表面,其依靠自身分泌或培养基中的贴附因子才能在该表面生长增殖的离体动物的培养细胞。
贴壁培养的细胞生长受限于表面积,这可能会限制生产产量,同时贴壁培养需要表面经过TC处理的细胞培养容器。
为什么需要TC处理
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TC全称是Tissue culturetreated,TC处理表示该器皿经过表面的改性处理,适合贴壁细胞的培养。而悬浮生长的细胞,就不一定需要这样经过特殊处理过的器皿。但经过表面的改性处理后的细胞培养皿等一般也适合悬浮细胞的培养。
大部分动物细胞需要贴附在一个固相界面上才能生长。而只有亲水的固相界面,细胞才能贴附。
最早的细胞培养器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是亲水的,不经过特殊的处理,普通的细胞就可以贴附生长。而聚苯乙烯透光性能好,具有较好的强度和易塑性,并且没有毒性,成为一次性细胞培养皿和细胞培养板等一次性细胞培养耗材的首选材料,然而聚苯乙烯表面是疏水的,所以需要经过表面的改性处理,增强细胞吸附与蛋白结合的能力,变成亲水后才能适用于细胞培养。
安进特细胞培养系列耗材的培养表面均采用真空等离子处理,该方法是利用真空下的稀薄气体,在电场作用下发生碰撞而形成高活性的等离子体,从而诱发塑料表面分子的化学键断裂而降解,增大表面粗糙度并增加其亲水性能,因此产品细胞贴壁性优良。
此外,安进特细胞培养皿、板、瓶均采用高度透明聚苯乙烯材质,电子束灭菌,无热源,无内毒素,采用堆叠设计,易于叠放且不易滑落。
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